Eine genaue Methode zur Papierelektrophoretischen Auswertung von Proteinen

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Abstract
Für die Anfärbung der Eiweissfraktionen auf Filtrierpapier wird Amidoschwarz benutzt, weil dieser Farbstoff ein sehr gutes Bindungsvermögen mit Protein hat und unabhängig von der Auswaschmethode mit den verschiedenen Eiweissfraktionen ein konstantes Bindungsverhältnis aufweist.Der Nachteil der schweren Auswaschbarkeit des Amidoschwarz an der nicht mit Eiweiss beladenen Stelle, wird beseitigt indem man einen einfachen Apparat gebraucht, worin die Papierstreifen bei 65° C mit 1%‐iger Essigsäure ausgewaschen werden.Nach eingehenden Untersuchungen der photometrischen Auswertung, haben wir die Folgerung gezogen, dass diese Methode aus prinzipiellen Gründen verwerflich ist.Deshalb wird die Elutionsmethode benutzt. Die Ursache der Unbeständigkeit von Amidoschwarz in Lauge wird untersucht, weil diese Unbeständigkeit selbstverständlich eine genaue Bestimmungsmethode verhindert.Es wurde gefunden, dass die Unbeständigkeit ihre Ursache in der Anwesenheit von Schwermetall‐ionen in Lauge hat, was durch Zufügung von “Komplexon” völlig beseitigt werden kann.Eiweissmengen bis 0.75 mg auf 2 cm2 Filtrierpapier weisen ein genaues lineares Verhältnis auf mit der Menge gebundenem Farbstoff.Die verschiedenen Eiweissfraktionen können nach Papierelektrophoretischer Trennung mit einer sehr geringen Fehler bestimmt werden.Für Alb. ± 0.5; α1 ± 0.3; α2 ± 0.3; β ± 0.3 und γ ± 0.4 rel. Prozente.Mit unserer Methode konnten bei 45 gesunden Personen Normalwerte bestimmt werden.Albumin 69.8 ± 1.5; α1‐Glob. 3.3 ± 03; α2‐Glob. 6.3 ± 0.6; β‐Glob. 7.9 ± 0.8 und γ‐Glob. 12.9 ± 1.3.

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