Văn Hiển Phạm

Mục tiêu: Xây dựng và thẩm định phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao (high‑performance liquid chromatography - HPLC) để định lượng silybin (Si) trong huyết tương chó. Phương pháp nghiên cứu: Thiết lập điều kiện sắc ký trên cột Luna C18; pha động MeOH:H₃PO₄:nước (pha A: 20:0,5:80; pha B: 80:0,5:20) theo chương trình gradient; thể tích tiêm mẫu là 100µL. Mẫu huyết tương được chuẩn bị bằng cách kết tủa protein sử dụng methanol (MeOH) hoặc acid percloric. Catechin được sử dụng làm chất chuẩn nội. Thẩm định phương pháp theo hướng dẫn của FDA với các tiêu chí: Độ chọn lọc - đặc hiệu, tính tương thích hệ thống, khoảng tuyến tính, độ chính xác, độ đúng, giới hạn phát hiện (LOD), giới hạn định lượng (LOQ) và độ ổn định. Kết quả: Xác định được các điều kiện xử lý mẫu và các điều kiện sắc ký. Phương pháp đảm bảo độ chọn lọc - đặc hiệu, tuyến tính tốt trong khoảng nồng độ 0,118 - 11,758 µg/mL Si-A và 0,128 - 12,754 µg/mL Si-B, với R² = 0,9997. Phương pháp đảm bảo độ lặp lại với RSD ≤ 3,99%. Độ thu hồi của phương pháp trong khoảng 85 - 115%. LOD/LOQ: Si-A (4,69/14,20 ng/mL), Si-B (2,79/8,46 ng/mL). Si ổn định trong huyết tương sau 24 giờ (độ thu hồi là 98,30 - 114,43%) và sau 3 chu kỳ đông - rã (độ thu hồi là 85,34 - 111,65%). Kết luận: Xây dựng và thẩm định được phương pháp HPLC để xác định hàm lượng Si trong huyết tương chó.

Mục tiêu: Bào chế tiểu phân nano polymer andrographolid (AG) bằng phương pháp nhũ hóa bốc hơi dung môi và đánh giá một số đặc tính và chỉ tiêu chất lượng của tiểu phân nano bào chế được. Phương pháp nghiên cứu: Bào chế nano polymer AG bằng phương pháp nhũ hoá bốc hơi dung môi. Hệ tiểu phân nano được tinh chế và rắn hoá thành dạng bột, sau đó được đánh giá một số đặc tính và chỉ tiêu chất lượng. Kết quả: Xây dựng được công thức bào chế nano polymer AG với Eudragit RL PO, tỷ lệ polymer/AG = 4:1; tỷ lệ lecithin/AG = 1:1; Tween 80 có nồng độ 0,7% trong nước; thể tích pha ngoại là 150mL. Sau khi tái phân tán, hệ có kích thước tiểu phân (KTTP) là 203,2 ± 7,8nm, PDI = 0,314 ± 0,007, thế Zeta = +53,2 ± 0,6mV; tiểu phân có hình cầu; độ tan tăng 4,51 lần so với AG nguyên liệu; hiệu suất nano hóa là 70,68%, hàm lượng AG đạt 11,12%. Hệ nano polymer cải thiện giải phóng, kéo dài và kiểm soát quá trình giải phóng dược chất; phổ IR và DSC cho thấy không có tương tác hóa học, AG tồn tại ở dạng vô định hình. Kết luận: Đã bào chế và đánh giá được một số đặc tính của hệ tiểu phân nano polymer AG.

Mục tiêu: Khảo sát lựa chọn phương pháp và thông số quy trình chiết xuất tannin từ lá Sến mật (Madhuca pasquier H. J. Lam). Phương pháp nghiên cứu: Khảo sát các yếu tố ảnh hưởng đến quá trình chiết xuất như phương pháp chiết và các thông số quy trình chiết gồm dung môi chiết, nhiệt độ chiết, tỷ lệ dung môi/dược liệu (DM/DL), thời gian chiết dựa vào hàm lượng tannin biểu kiến và hiệu suất chiết tannin. Kết quả: Lựa chọn được phương pháp chiết xuất là chiết vi sóng với các thông số quy trình gồm: Dung môi chiết xuất là ethanol 70%, nhiệt độ chiết xuất là 70°C, số lần chiết là 1 lần, tỷ lệ DM/DL là 30/1 mL/g, thời gian chiết là 30 phút. Từ phương pháp chiết và các thông số khảo sát được ở trên, xác định được hiệu suất chiết tannin từ lá Sến mật đạt 89,11 ± 1,84%. Kết luận: Đã khảo sát lựa chọn được phương pháp và các thông số quy trình chiết xuất tannin từ lá Sến mật.

Mục tiêu: Đánh giá độc tính cấp và bán trường diễn của cao khô hành đen trên mô hình động vật thực nghiệm. Phương pháp nghiên cứu: Độc tính cấp của cao khô hành đen được đánh giá trên chuột nhắt trắng Swiss theo phương pháp Litchfield - Wilcoxon. Độc tính bán trường diễn của cao khô hành đen được đánh giá trên thỏ New Zealand White với liều lượng 375 mg/kg/ngày và 750 mg/kg/ngày trong 28 ngày và dựa vào các chỉ tiêu thường quy về xét nghiệm huyết học, sinh hoá máu và hình ảnh mô bệnh học. Kết quả: Chưa xác định được LD₅₀ của cao khô hành đen tới mức liều cao nhất có thể cho chuột uống. Cao khô hành đen không gây độc với liều tối đa 3000 mg/kg ở chuột nhắt trắng. Cao khô hành đen cho thỏ uống ở các mức liều 375 mg/kg/ngày và 750 mg/kg/ngày trong 28 ngày không quan sát thấy sự thay đổi về tình trạng chung, không gây ra sự thay đổi về sự phát triển trọng lượng cơ thể thỏ; không quan sát thấy sự thay đổi có ý nghĩa về chỉ số hồng cầu, bạch cầu huyết sắc tố, nồng độ AST, ALT, creatinine và ure. Trên mô bệnh học, không thấy sự khác biệt giữa các lô thử và lô chứng về màu sắc, hình thái của gan, thận và lách. Kết luận: Cao khô hành đen không gây độc cấp tính với liều tối đa 3000 mg/kg trên chuột nhắt trắng và không gây độc bán trường diễn tới 28 ngày trên thỏ khi uống các mức liều 375 mg/kg/ngày và 750 mg/kg/ngày.

Mục tiêu: Bào chế được cao lỏng hành đen giàu cycloalliin (CYC). Phương pháp nghiên cứu: Các thông số ảnh hưởng đến chiết xuất cao giàu CYC từ hành đen được khảo sát và lựa chọn. Áp dụng các thông số lựa chọn được để xây dựng quy trình chiết xuất 200 g/mẻ và đánh giá độ lặp lại của quy trình thông qua độ thu hồi CYC. Kết quả: Các thông số phù hợp của quá trình chiết xuất cao lỏng hành đen giàu CYC đã được khảo sát và lựa chọn. Các thông số đó bao gồm phương pháp chiết là chiết nóng, dung môi chiết là ethanol (EtOH) 50%, tỷ lệ dung môi/dược liệu là 20/1 (mL/g), số lần chiết là 2 lần, nhiệt độ chiết là 80°C, thời gian cho mỗi lần chiết là 120 phút. Áp dụng các thông số trên, nghiên cứu này đã xây dựng được quy trình chiết xuất cao lỏng hành đen quy mô 200 g/mẻ với hiệu suất thu hồi cycloallin đạt 90,3 ± 0,6%. Kết luận: Xây dựng thành công quy trình bào chế cao lỏng hành đen giàu CYC quy mô 200 g/mẻ.

Mục tiêu: Đánh giá các yếu tố ảnh hưởng đến quá trình tạo hỗn dịch nano phytosome bằng phương pháp hydrat hóa màng film phức hợp silybin - phosphatidyl cholin (Si-PC). Phương pháp nghiên cứu: Bào chế hỗn dịch nano bằng phương pháp hydrat hoá trong pha ngoại, khảo sát ảnh hưởng của loại dung môi, thể tích dung môi, điều kiện siêu âm đến kích thước tiểu phân, độ ổn định của hệ, hiệu suất mang thuốc và độ tan, độ hòa tan của dược chất. Kết quả: Với điều kiện sử dụng pha ngoại là nước tỷ lệ 8:1, sử dụng sóng siêu âm công suất 720W trong thời gian 10 phút, hỗn dịch nano phytosome silybin tạo ra có kích thước tiểu phân (KTTP) là 179,3 ± 8,3nm với chỉ số PDI < 0,5; trị tuyệt đối thế Zeta > 30mV. Dạng nano phytosome đã cải thiện độ tan của silybin trong nước (gấp 1,64 lần dạng phức hợp) và độ hòa tan của silybin trong môi trường pH 1,2 và pH 6,8 so với dạng phức hợp. Kết luận: Đã lựa chọn được các thông số của quá trình tạo hỗn dịch nano phytosome silybin bằng phương pháp hydrat hóa màng film kết hợp siêu âm đầu dò.

Mục tiêu: Xây dựng quy trình phun sấy tạo bột phytosome silybin từ hỗn dịch nano phytosome. Phương pháp nghiên cứu: Phun sấy tạo bột cao khô bằng thiết bị phun sấy ly tâm LPG-5 từ hỗn dịch nano phytosome silybin. Đánh giá ảnh hưởng của các yếu tố đến quá trình phun sấy gồm: Loại tá dược (maltodextrin, Aerosil), tỷ lệ tá dược/chất rắn (TD/CR), nhiệt độ phun sấy và tốc độ cấp dịch. Kết quả: Lựa chọn được thông số quy trình phun sấy thích hợp: Tá dược hỗ trợ phun sấy: MD/AE (80/20); tỷ lệ tá dược/chất rắn: 0,5/1; nhiệt độ khí đầu vào: 140ºC; tốc độ cấp dịch: 10 mL/phút. Bột phytosome silybin phun sấy (công thức M7) có độ ẩm là 3,46 ± 0,1%, khối lượng riêng 0,416 ± 0,02 g/mL, chỉ số nén 19,33 ± 0,83% hàm lượng silybin toàn phần là 13,97 ± 0,46%, hàm lượng silybin dạng phytosome là 12,82 ± 0,27%. Kết luận: Xây dựng thành công quy trình tạo bột phytosome silybin bằng phương pháp phun sấy để ứng dụng vào các dạng thuốc rắn dùng đường uống.

Memantine hydrochloride is a medicine used for the treatment of Alzheimer’s disease. A number of methods for the preparation of memantine hydrochloride have been reported. These procedures started from 1,3-dimethyl-adamantane by as many as using three or four reaction steps to produce memantine hydrochloride with overall yields ranging from 54 to 77%. In this article, a simple, concise two-step synthesis of memantine hydrochloride from 1,3-dimethyl-adamantane via N-formamido-3,5-dimethyl-adamantane with an improved overall yield of 83% was developed. In step 1, 3,5-dimethyl-adamantane was reacted with formamide and nitric acid to afford 1-formamido-3,5-dimethyl-adamantane in 98% yield, followed by hydrolysis of 1-formamido-3,5-dimethyl-adamantane with aq hydrochloride to give memantine hydrochloride in 85% yield. The procedure can be easily deployed at an industrial scale.