Imene Ait Mohamed Amar

Les anticorps armés, aussi appelés immunoconjugués ou antibody-drug conjugate (ADC) en anglais, représentent une approche thérapeutique prometteuse pour les patients atteints de cancer, en combinant un agent cytotoxique puissant (drug) avec la spécificité de ciblage d'un anticorps monoclonal thérapeutique (mAb) via l'intermédiaire d'un bras espaceur (linker). La mise sur le marché aux Etats-Unis de l'Adcetris® (brentuximab vedotin) en 2011 et du Kadcyla® (trastuzumab emtansine ou T-DM1) en 2013 par la Food and Drug Administration (FDA) a relancé l'intérêt des ADCs, en validant leur utilisation en clinique, après l'abandon du Mylotarg® (gemtuzumab ozogamycin) en 2010. Aujourd'hui, 11 ADCs sont approuvés par la FDA tandis que 80 sont en essais cliniques. Les ADCs ont fait l'objet de recherches très actives ces dernières années, ce qui a mené à plusieurs générations d'ADCs, dirigées contre différents types de tumeurs, liquides et solides. Cependant, l'obtention des ADCs est associée à des verrous technologiques liés à leur homogénéité, à la reproductibilité de leur production et à leur stabilité. De plus, depuis quelques années, l'utilisation des ADCs en clinique est associée à l'apparition de plusieurs mécanismes de résistance dans la cellule cancéreuse. Enfin, les ADCs sont principalement basés sur le format IgG, associé à une mauvaise pénétration tumorale (tumeur solide) ainsi qu'une toxicité, indépendante de la cible, médiée par la partie Fc de l'anticorps. Pour pallier ces limitations et améliorer l'index thérapeutique de nos conjugués, nous avons développé des ADCs de nouvelle génération via la mise au point et l'évaluation biologique de nouveaux formats de bioconjugués en utilisant des fragments d'anticorps de type scFv, diabody et minibody et une méthode de bioconjugaison brevetée et propriétaire au laboratoire. Une étude d'optimisation des conjugués a également été élaborée avec la conception, la synthèse et la caractérisation de linker-cytotoxiques originaux soit (i) comprenant un agent contrôleur d'hydrophobicité, permettant la production de conjugués IgG et fragments d'anticorps à DAR élevés, soit (ii) porteur d'une gâchette (déclencheur) peptidique, dont la molécule cytotoxique peut être libérée sélectivement par une protéase surexprimée dans le milieu extracellulaire du microenvironnement tumoral. Les meilleurs conjugués candidats ont fait l'objet d'une évaluation de l'efficacité in vitro et in vivo, sur modèles murins HER2+, complétée d'une étude d'internalisation cellulaire in vitro et d'une étude de biodistribution in vivo. Les résultats obtenus permettront d'orienter les prochaines recherches vers le conjugué idéal (format d'anticorps, DAR et linker idéaux), proposant les caractéristiques biologiques et physico-chimiques adéquates pour le ciblage des tumeurs solides comme les cancers du sein. Ces études sont complétées par l'évaluation de l'efficacité d'un ADC en association aux inhibiteurs de point de contrôle (IPCIs) dans l'espoir d'induire une réponse immunitaire antitumorale pour lever la résistance des cellules cancéreuses aux IPCIs. Nous avons également exploré la capacité de bioconjugaison d'un inhibiteur de topoisomérase I de type foldamère sur le format IgG et scFv via notre technologie de bioconjugaison ainsi que l'évaluation de son internalisation cellulaire et de ces capacités antiprolifératives. Les résultats de ces expérimentations permettront de diriger les travaux futurs vers des essais en recherche clinique de phase I, pour des patientes réfractaires ou résistantes, qui ne répondent pas ou plus aux traitements actuels.Mots clefs : Bras espaceur = Linker ; molécule cytotoxique = Drug ; ADC = anticorps armé de format IgG ; FDC = format d'anticorps armé, dont le format est de type scFv, minibody et diabody ; DAR (drug-to-antibody ratio) = nombre de molécules cytotoxiques greffées sur l'anticorps.

Objective: Extensively hydrolyzed formulas (eHF) are the first‐line approach for cow's milk protein allergy (CMPA). This study evaluated the effects of eHF with synbiotic eHF (SeHF) on the general condition and symptoms of presumed CMPA infants during the initial 4‐week exclusion diet period. Methods: This observational prospective study (NCT04893330) recruited 114 patients (intention‐to‐treat [ITT] population; aged ≤8 months) with presumed CMPA. Patients were followed up for 28 days (D28) (per‐protocol [PP], n = 80). Changes in general condition and presumed allergic symptoms were assessed using a 4‐level Likert scale. Secondary endpoints included the time to symptom improvement, formula acceptability and consumption, and the parent's quality of life (QoL). Results: The presumed allergic symptoms had improved/resolved for 86.3% of the PP population in 7–10 days on average. 86.8% of ITT cases had digestive symptoms at baseline and those reduced/disappeared in 93.2% of the PP cases at D28. The majority of parents agreed that the formula was suitable for the baby (78.8%). The QoL significantly improved from 60 ± 28 to 42 ± 24 ( p < 0.001). Conclusion: This study reflects the real‐world management of presumed CMPA in our private practices using SeHF, which effectively improved CMPA symptoms. It also highlights the importance of waiting at least 2 weeks before reconsidering CMPA diagnosis.

Antibody–drug conjugates (ADCs) derived from a full immunoglobulin-G (IgG) are associated with suboptimal solid-tumor penetration and Fc-mediated toxicities. Antibody fragment–drug conjugates (FDCs) could be an alternative. Nevertheless, innovative solutions are needed to implant cysteines as conjugation sites in the single-chain fragment variable (scFv) format, which is the backbone from which many other antibody formats are built. In addition, the bioconjugation site has the utmost importance to optimize the safety and efficacy of bioconjugates. Our previous intra-tag cysteine (ITC) strategy consisted of introducing a bioconjugation motif at the C-terminal position of the 4D5.2 scFv, but this motif was subjected to proteolysis when the scFv was produced in CHO cells. Considering these data, using three intra-domain cysteine (IDC) strategies, several parameters were studied to assess the impact of different locations of a site-specific bioconjugation motif in the variable domains of an anti-HER2 scFv. In comparison to the ITC strategy, our new IDC strategy allowed us to identify new fragment–drug conjugates (FDCs) devoid of proteolysis and exhibiting enhanced stability profiles, better affinity, and better ability to kill selectively HER2-positive SK-BR-3 cells in vitro at picomolar concentrations. Thus, this work represents an important optimization step in the design of more complex and effective conjugates.