Nina Ditsch

PURPOSE: Surgical axillary staging in patients with node-positive breast cancer (BC) who converted to clinical node negativity through neoadjuvant chemotherapy (NACT) has changed significantly in recent years. Targeted axillary dissection (TAD) and target lymph node (TLN) biopsy (TLNB) became increasingly popular. However, data comparing marking techniques for the TLN are limited. Here, we evaluate marking techniques in the largest prospective cohort worldwide. MATERIALS AND METHODS: Among patients from the ongoing prospective multicenter AXSANA (EUBREAST-03) study who received TLN marking and TAD/TLNB, we evaluated different marking methods with respect to detection and removal rates and clinical performance. RESULTS: Until January 6, 2025, 6,129 patients from 26 countries were enrolled. Of these patients, 2,596 had ≥1 TLN marked before NACT and completed surgery; 13.3% of the patients had ≥4 suspicious nodes at diagnosis. Pre-NACT TLN marking used a clip in 2,003 patients (77.2%), magnetic seed in 287 (11.1%), carbon ink in 192 (7.4%), radar marker in 119 (4.6%), radioactive seed in 18 (0.7%), radiofrequency identification device (RFID) in 12 (0.5%), or other methods in two (0.1%). One TLN was marked in 2,427 patients (93.5%), two TLNs in 138 (5.3%), and ≥3 in 27 patients (1%). Targeted removal of the TLN was planned in 2,100 patients (80.9%; TAD in 2,076 [80.0%] and TLNB in 24 [0.9%]). The TLN was detected and removed by TAD/TLNB in 1,915 patients (91.2%). TLN detection rate was the highest in patients whose TLNs were marked pre-NACT with markers suitable for probe-guided detection (96.6%; radioactive seed: 100%, magnetic seed: 96.9%, radar marker: 96.1%, RFID: 90%), followed by carbon ink (94.9%) and clip (89.6%; P < .001). CONCLUSION: This large prospective analysis of patients with initially clinically node-positive BC receiving NACT demonstrates that probe-guided detection markers used to mark metastatic nodes before NACT provide superior detection rates.

Einleitung Primäres Ziel der SerMa (Serom-Untersuchung nach operativem Mammaeingriff) Pilot-Studie war es, mögliche immunologische bzw. inflam-matorisch Faktoren im Zusammenhang mit der Seromentstehung nach Mastektomie und Erstdiagnose eines Mammakarzinoms zu identifizieren. Erste Daten wurden hierzu durch die Studiengruppe bereits publiziert. Von besonderem Interesse für die hier vorgestellte Arbeit ist die Untersuchung eines Zusammenhangs tumorbiologischer Eigenschaften und des Microenvironment mit einer postoperativen Seromentwicklung. Tumorassoziierte Makrophagen sind charakterisiert durch die Expression von CD68 und CD163. Material und Methodik Bis dato gingen in die Auswertung 55 Patientinnen ein, welche Leitlinien-gerecht systemisch und lokal therapiert wurden. Die Mastektomiepräparate wurden histopathologisch ausgewertet. Zur Beantwortung der Fragestellung wurden zwei Gruppen gebildet: Patientinnen mit Serom-entstehung und Patientinnen ohne Seromentstehung. An den Schnittpräparaten wurden Makrophagen mit Hilfe der Antikörper gegen CD68 und CD163 immunhistochemisch analysiert. Anschließend wurde die Anzahl der Makrophagen in unmittelbarer Tumorumgebung an drei für das jeweilige Präparat repräsentativen Stellen im gesamten Gesichtsfeld bei einer Vergrößerung von 40x Objektiv manuell quantifiziert und für die folgenden statistischen Berechnungen der Mittelwert der drei Bereiche gebildet. Ergebnisse Die Seromrate während des Zeitraums der Pilotstudie lag bei 22,9% aller Mastektomien. Bei CD68 lag der Range zwischen 0 und 192 Makrophagen, der Mittelwert betrug 93 und der Median 90. Bei Patientinnen mit einer postoperativen Serom-entwicklung war die Anzahl der CD68-positiven Makrophagen signifikant erhöht (p=0,036) im Vergleich zu Patientinnen ohne Seromentwicklung. Bei CD 163 lag der Range zwischen 0 und 195 Makrophagen, der Mittelwert betrug 52 und der Median 45. Auch hier war die Anzahl der CD163-positiven Makrophagen bei Patientinnen mit postoperativer Seromentwicklung signifikant erhöht (p=0,033) im Vergleich zu Patientinnen ohne Seromentwicklung. Zusammenfassung Die genauen Ursachen der Serombildung sind trotz der Tatsache, dass diese eine der häufigsten Komplikationen von Mamma-Operationen darstellt, bisher noch nicht vollständig geklärt. Unsere Untersuchungen zeigen eine signifikante Korrelation der Makrophagenmarker CD68 und CD163 mit einer postoperativen Seromentstehung in der Brust und untermauern damit unsere ersten Ergebnisse zur Identifikation von Immunzellen in Seromflüssigkeiten. Sie könnten der Grundstein für die Etablierung eines neuen prognostischen Markers für die Seromentstehung bei Mammakarzinomen, die mittels Mastektomie therapiert wurden, sein. Bei einer Reihe von Tumorentitäten werden CD68 und CD163 bereits als neue prognostische Marker für das tumorfreie Überleben und auch Gesamtüberleben diskutiert. Weitere Untersuchungen an einem größeren Kollektiv laufen derzeit. Fördermittel Gefördert durch ein Forschungsstipendium der Medizinischen Fakultät der Universität Augsburg ("Projektförderung-Intramurale Forschungsförderung Medizinische Fakultät") für N.D. (190.000 Euro). Article published online: 06 June 2023 © 2023. Thieme. All rights reserved. Georg Thieme Verlag Rüdigerstraße 14, 70469 Stuttgart, Germany

Einleitung „WAVES“ (Wechselseitiger Patienten-Arzt-Austausch in der Versorgung bei Brustkrebs mit dem Ziel der gemeinsamen Erarbeitung neuer Patienten-orientierter Strukturen) ist die erste im Rahmen des BZKF (Bayerisches Zentrum für Krebsforschung mit Beteiligung aller 6 Universitätsklinika) geförderte Studie zum Thema Brustkrebs. Material und Methodik Primäres Ziel ist die Beleuchtung aktueller Versorgungsstrukturen bei Brustkrebs mit speziellem Fokus auf Patientenkommunikation. Mit Hilfe eigens sowohl für Patient:innen als auch Ärzt:innen und erstmalig gemeinsam von Patientenselbsthilfegruppen mit Ärzt:innen, onkologischen Pflegekräften, BreastCare Nurses, Psycholog:innen, Psychiater:innen und Kolleg:innen der Psychosomatik wie auch Kommunikationsspezialist:innen entwickelten Fragebögen sollen einzelne Punkte zu Erlangung langfristiger Ziele beleuchtet werden. Letztere inkludieren v.a. die Erarbeitung eines verbesserten Patient:innen-zentrierten und auch dem Zeitmanagement von Ärzt:innen gerecht werdenden Versorgungskonzepts bei Brustkrebs. Diese Präsentation umfasst erste Ergebnisse einer Zwischenauswertung zum Erleben des Erstgesprächs aus Sicht der Patient:innen. Ergebnisse Die Analyse bezieht sich auf die ersten 585 Teilnehmer:innen. Die Gesprächszeit bei Diagnosemitteilung divergierte stark: 10 Minuten (20,5 %), 15 Minuten (20,5 %), 20 Minuten (19,4 %), 30 Minuten (17,7 %) und >30 Minuten (14,7 %). 7,3% machten keine Angabe zur Dauer. Der Anteil an Patient:innen, die die Gesprächszeit als „genau richtig“ angaben, stieg mit zunehmender Aufklärungs-Gesprächsdauer an. Während nur 14,5% der Patient:innen eine Gesprächsdauer von 10 Minuten „genau richtig“ empfanden, stieg der Anteil bei 20 Minuten auf 54,5% (p<0,001). Dauerte das Gespräch mehr als 30 Minuten, beurteilten mit 88,2% signifikant mehr Patient:innen die Dauer als „genau richtig“ als bei 10 bzw. 20 Minuten (beide p<0,001). Vorherrschende Gefühle im Zusammenhang mit der Mitteilung der Diagnose waren Schock (56,9%), Angst (40,1%) sowie Hilflosigkeit (26,6%). Zusammenfassung Erste Ergebnisse der WAVES-Studie bestätigen die Annahme einer deutlich höheren Zufriedenheit von Patient:innen im Zusammenhang mit der Mitteilung der Erstdiagnose Brustkrebs, wenn sich die Ärztin / der Arzt Zeit dafür nahm, im Idealfall mindestens 30 Minuten. Der Bedarf an verbesserter Kommunikation hinsichtlich eines angemessenen Zeitrahmens für die Diagnoseübermittlung bei Brustkrebs-Erkrankten wird damit klar aufgezeigt. Diese Daten bieten die Grundlage für eine mögliche Umstrukturierung in der Behandlung Brustkrebs-Erkrankter, die bisher in der aktuellen Vergütungsstruktur nicht abgebildet ist. Die Studie rekrutiert weiterhin. Fördermittel Funding-Source: Bayrisches Zentrum für Krebsforschung (BZKF) Funding-Statement: 250.000 Euro (2021-2024) Article published online: 06 June 2023 © 2023. Thieme. All rights reserved. Georg Thieme Verlag Rüdigerstraße 14, 70469 Stuttgart, Germany

Einleitung Kernrezeptoren wie Östrogen- (ÖR) oder Progesteron-Rezeptor (PR) sind etablierte prognostische Marker bei Brustkrebs und dienen als Ansatzpunkt für zielgerichtete Tumortherapie. Darüber hinaus rücken weitere Kernrezeptoren wie zum Beispiel der Vitamin-D-Rezeptor (VDR) in den Fokus der Forschung [1], ebenso neue prognostische Marker wie beispielsweise das Vorhandensein von Tumor-Infiltrierenden Lymphozyten (TILs). Insbesondere bei triple-negativen und HER-2 überexprimierenden Brustkrebssubtypen konnte ein Überlebensvorteil durch eine hohe Rate an TILs gezeigt werden [2]. Stimuli für das Einströmen der TILs in das Tumorareal sind Gegenstand laufender Untersuchungen. Material und Methoden In dieser Studie wurden die Zusammenhänge zwischen nukleärer Expression der genannten Kernrezeptoren (ÖR und VDR), Quantifizierung von TILs in Brustkrebsgewebe und prognostischer Bedeutung untersucht. Grundlage bildete ein bekanntes Brustkrebs-Kollektiv von 320 Fällen, die zwischen 2000 und 2002 an der Klinik für Frauenheilkunde und Geburtshilfe der Ludwigs-Maximilians-Universität München behandelt wurden [3]. Die Quantifizierung der TILs erfolgte am Institut national de la santé et de la recherche médicale (INSERM) in Montpellier nach den Klintrup-Kriterien [4]. Hiernach erfolgten Spearman’s-Rho-Korrelationsanalysen zur Korrelation mit der Kernrezeptor-Expression und Überlebenszeitanalysen mittels Kaplan-Meier-Analysen. Alle Berechnungen wurden mit IBM SPSS Statistics (Version 24) durchgeführt. Ergebnisse In der vorliegenden Untersuchung korreliert der Einstrom von TILs in das Tumorgewebe negativ mit der Expression von ÖR und VDR. Dies führt jedoch zu unterschiedlichen Effekten in Bezug auf das Überleben. Es zeigt sich, dass die Expression von ÖR ein positiver prognostischer Marker nur bei geringer und mittlerer TIL-Infiltration ist, so liegt das 5-Jahres-Überleben bei 20 % für ÖR-negative Fälle und 90 % für ÖR-positive Fälle (p < 0,005) bei geringer TIL-Infiltration (s. [Abb. 1a]). Bei hoher TIL-Infiltration hingegen spielt die Expression von ÖR keine Rolle für das Überleben (5-Jahres-Überleben von 80% bei ÖR-positiven vs. 85% bei ÖR-negativen Fällen, p = 0,64) (s. [Abb. 1b]). Gegensätzliche Ergebnisse zeigt die VDR-Überlebensanalyse. Bei geringer TIL-Infiltration ist die VDR-Expression mit einem signifikant schlechteren krankheitsfreien Überleben vergesellschaftet (5-Jahres-krankheitsfreies-Überleben bei 65 % vs. 88 % bei fehlender VDR-Expression, p = 0,037) (s. [Abb. 2a]). Bei hoher TIL-Infiltration zeigt sich auch hier kein signifikanter Unterschied im krankheitsfreien Überleben in Abhängigkeit von der VDR-Expression (5-Jahres-krankheitsfreies-Überleben bei 65 % bei VDR-positiven vs. 70 % bei VDR-negativen Fällen, p = 0,708) (s. [Abb. 2b]). Zusammenfassung Die vorliegende Untersuchung zeigt ein differenziertes Bild individueller Zusammenhänge zwischen TILs, jeweiligem Kernrezeptor und Einfluss auf das Überleben. Insbesondere der Zusammenhang zwischen fehlender TIL-Infiltration und signifikant erniedrigtem rezidivfreien Überleben bei hoher VDR-Expression war bisher nicht bekannt. Diese Daten unterstützen die These, dass die Kernexpression von ÖR und VDR über bisher ungeklärte Mechanismen ein Einströmen von TILs in das Tumorareal beeinflusst. Da sich hieraus ein signifikanter Effekt auf das Überleben von Mammakarzinompatientinnen zu ergeben scheint, können mit diesem Wissen perspektivisch neue Therapieansätze entwickelt werden. Dies ist von besonderem Interesse in der Behandlung von Frauen mit triple-negativem Brustkrebs, bei denen derzeit nur begrenzte systemtherapeutische Optionen bestehen. Article published online: 19 May 2022 © 2022. Thieme. All rights reserved. Georg Thieme Verlag Rüdigerstraße 14, 70469 Stuttgart, Germany

Purpose: COX-2 overexpression and elevated levels of prostaglandin E2 (PGE2) play an important role in breast cancer carcinogenesis. Recently, expression of the PGE2 receptor EP3 has been shown to be a positive prognostic factor in breast cancer. This study analyzes the functional aspects of targeting EP3 in breast cancer cell lines. Material and methods: EP3 and EP1 expressions were determined in five breast cancer cell lines on the mRNA- and the protein-level. The selected cell lines were subsequently stimulated for 24–72 hrs with 10–1,000 nM of PGE2, the EP1/EP3 agonist sulprostone and the EP3 antagonist L798,106. Cell proliferation was determined via BrdU-assay, migration via scratch assay, EP3, Gi-protein and p-ERK1/2 expressions via Western blot and cAMP concentrations via ELISA. The Mann–Whitney-U-test was used to test for statistical significance. Results: The cell lines T-47D (EP3 expression 77.7%) and SK-BR-3 (EP3 expression 48.7%) were chosen. EP3 antagonism reduced its expression on SK-BR-3 significantly, while no effect was observed on T-47D. The proliferation and migration of SK-BR-3 cells were significantly reduced due to treatment with the EP1/3 agonist, the EP3 antagonist or a combination of both. Neither agonism nor antagonism influenced cell proliferation or migration in T-47D. In SK-BR-3, EP3 antagonism showed a significant decrease in Gi-protein levels, an increase in cAMP levels, and no significant change in p-ERK1/2 expression. Conclusion: Antagonism of the EP3 receptor results in a reduced proliferation and migration of SK-BR-3 breast cancer cells, potentially mediated via a Gi-protein-cAMP pathway. The results suggest that EP3 plays a role in tumorigenesis. This is in accordance with the cell culture data of other gynecological tumors, but it is conflicting in so far, as positive EP3 expression is clinically a positive prognostic marker in breast cancer. Therefore, other factors may be important in explaining this contradiction.

Objectives: A correlation exists between breast cancer and thyroid disorders, which are common in elderly women. Thyroid hormones are degraded into trace amines, which can bind to the G-protein-coupled receptor trace amine-associated receptor 1 (TAAR1) and thereby activate it. The transformation of thyroid hormones into trace amines is carried out by the ornithine decarboxylase. Previously, we showed that TAAR1 overexpression (IRS ≥6) was associated with a significantly longer OS in primary breast cancer patients during a long-term follow-up of up to 14 years. Aim of the present study was to analyze the regulation of TAAR1 in breast cancer cell lines and the influence of triiodothyronine (T₃), thyronamines, and tetraiodothyroacetic acid (Tetrac) on the expression of TAAR1 in breast cancer cells. Methods: The effect of T₃, thyronamines, and Tetrac on the expression of TAAR1 in breast cancer cell lines MCF-7 and T47D was analyzed via PCR and Western blot. A MTT assay was performed to test the metabolic cell viability. A scratch assay was performed to analyze cell migration. Results: Stimulation of MCF-7 cells with 10 nM 3-iodothyronamine (T₁AM) significantly increased TAAR1 protein expression (P=0.008). In T47D cells, TAAR1 expression was significantly upregulated after the addition of 10 µg/mL estradiol to 10 nM T₁AM (P=0.008). A significant (P=0.028) reduction in MCF-7 cell viability through the incubation with T₁AM could be detected. Cell migration of MCF cells was significantly reduced through incubation with 10 nM T₁AM. Conclusion: A significant upregulation of TAAR1 induced by stimulation with T₁AM may be a sign for an increased decarboxylation of thyroid hormones in breast cancer cells. In addition, there seems to be an influence of estradiol for the T₁AM-induced upregulation of TAAR1 in T47D cells. TAAR1-related cell transduction mechanisms seem to be an interesting target for endocrine treatment options of breast cancer patients.